分子生化

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服务介绍

免疫共沉淀技术服      

       免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)技术是检测蛋白质间相互作用的经典方法, 其基本原理是以细胞内源性靶蛋白为诱饵,将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育,促进免疫复合物的形成;随后加入能够与抗体Fc段结合的prorein A/G(预先结合固化在琼脂糖小珠上),形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体-proteinA/G小珠”复合物,纯化该复合物后凝胶电泳分离蛋白,应用Western blot 或者质谱技术鉴定靶蛋白的结合蛋白。

      与其它研究方法相比,免疫共沉淀最大的优势在于该体系是在生理条件下检测蛋白质之间的相互作用,因此,不仅可以检测到体内形成的天然复合体,而且可排除过表达靶蛋白所带来的假阳性。其次内源性的靶蛋白质是完全加工、修饰和成熟的蛋白质,因此,依赖于修饰的蛋白质相互作用也能被检测到。

 

免疫共沉淀实验原理图

服务内容

      1.构建表达质粒(如果客户有完成的亦可交接给我们);

      2.细胞转染;

      3.收集并裂解细胞;

      4.加入蛋白A/G和抗体共同孵育;

      5.WB检测/质谱检测;

      6.出具实验报告。

服务说明

      1.客户尽量提供构建好的目的基因表达质粒和抗体。如不能提供,请提供基因序列或NCBI的收录号,由我公司完成克隆及载体构建服务,此部分另行收费。如果需要购买抗体,也应提前告知。

      2.我公司有多种标签质粒的抗体可供选择:myc,HA,n-flag,GFP等,请根据实验需求进行选择。

      3.由于不同实验的样本数量有差异,会影响实验周期。因此在签订服务合同之时应先原定服务周期。

      4.交接其他涉及免疫共沉淀的相关信息。

5.服务费用及周期请联系具体的销售专员。

质量承诺

      1.权威完整的实验报告及分析( 本公司提供可靠,真实的免疫共沉淀结果,但不保证一定能够得到特定结果。);

      2.真实的原始实验数据;

      3.详细的实验步骤。